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      菌落計(jì)數(shù)器操作全流程與常見故障排除

      發(fā)布時(shí)間:2026-01-16   點(diǎn)擊次數(shù):28次

      在微生物檢測(cè)、食品工業(yè)及科研實(shí)驗(yàn)中,菌落計(jì)數(shù)器是量化微生物污染程度的核心工具。其通過圖像識(shí)別或人工計(jì)數(shù)技術(shù)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)量,直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。本文系統(tǒng)梳理其操作流程與常見故障排除方法,助力操作者提升效率與可靠性。

      一、操作前準(zhǔn)備:細(xì)節(jié)決定成敗?

      操作前,需完成三項(xiàng)關(guān)鍵準(zhǔn)備:
      1. 設(shè)備檢查:確認(rèn)電源連接穩(wěn)定(若為電子型),光源(如環(huán)形LED燈)無頻閃或暗區(qū),攝像頭/光學(xué)鏡頭清潔無污漬(可用無水乙醇輕拭);若為手動(dòng)型,需檢查計(jì)數(shù)筆靈敏度及壓板彈性。
      2. 樣品預(yù)處理:待計(jì)數(shù)的培養(yǎng)皿需冷卻至室溫(避免熱氣干擾視野),并輕搖使菌落分布均勻;若菌落過密(>300個(gè)/皿),建議梯度稀釋后重新培養(yǎng),防止重疊導(dǎo)致漏計(jì)。
      3. 參數(shù)設(shè)置(針對(duì)智能型):根據(jù)培養(yǎng)基類型(如營養(yǎng)瓊脂、選擇性培養(yǎng)基)調(diào)整光源亮度(通常500-800lux)、對(duì)比度(增強(qiáng)菌落與背景色差),部分機(jī)型支持“自動(dòng)識(shí)別閾值”校準(zhǔn),需提前用標(biāo)準(zhǔn)樣片驗(yàn)證。

      二、操作流程:規(guī)范步驟保障數(shù)據(jù)精準(zhǔn)?

      以主流的“半自動(dòng)+圖像輔助”型菌落計(jì)數(shù)器為例,操作流程可分為五步:
      1. 放置與對(duì)焦?
      將培養(yǎng)皿倒扣于載物臺(tái)(避免冷凝水滴落干擾),輕旋調(diào)焦旋鈕使菌落清晰成像。若為倒置顯微鏡式設(shè)計(jì),需確保物鏡與皿底間距適中(約5-10mm),避免壓損菌落。
      2. 模式選擇與初篩?
      • 手動(dòng)模式:通過觸控屏或按鍵逐個(gè)標(biāo)記菌落(適合稀疏或形態(tài)特殊的菌落);
      • 自動(dòng)模式:啟動(dòng)“區(qū)域掃描”,軟件基于顏色/灰度差異識(shí)別菌落,生成預(yù)覽圖并標(biāo)注疑似目標(biāo)(需人工復(fù)核)。
      3. 人工復(fù)核與修正?
      自動(dòng)識(shí)別易受雜質(zhì)(如氣泡、培養(yǎng)基裂紋)或連生菌落干擾,需重點(diǎn)檢查:
      • 連生菌落:若兩個(gè)及以上菌落未完全分離但中心間距<1mm,按1個(gè)計(jì)數(shù);若間距>1mm,需用分割線手動(dòng)拆分;
      • 異常點(diǎn):直徑<0.5mm的微小菌落實(shí)為雜菌或氣泡,需結(jié)合培養(yǎng)特征(如邊緣是否規(guī)則)判斷是否剔除。
      4. 數(shù)據(jù)存儲(chǔ)與輸出?
      確認(rèn)計(jì)數(shù)結(jié)果后,點(diǎn)擊“保存”并關(guān)聯(lián)樣品信息(如編號(hào)、檢測(cè)時(shí)間、稀釋倍數(shù)),支持導(dǎo)出Excel或PDF報(bào)告。部分機(jī)型可同步上傳至LIMS系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)溯源。
      5. 清潔與關(guān)機(jī)?
      計(jì)數(shù)完成后,用75%酒精棉片擦拭載物臺(tái)與鏡頭(避免液體滲入機(jī)身),關(guān)閉光源與主機(jī)電源;若為手動(dòng)型,需歸位計(jì)數(shù)筆并覆蓋防塵罩。

      三、常見故障排除:快速定位解決問題?

      故障現(xiàn)象?
      可能原因?
      解決方法?
      成像模糊或有重影
      鏡頭臟污/焦距未調(diào)準(zhǔn)
      清潔鏡頭,重新旋轉(zhuǎn)調(diào)焦旋鈕至圖像銳利
      自動(dòng)計(jì)數(shù)偏差大(多計(jì)/少計(jì))
      光源不均(局部過亮/過暗)、菌落與背景色差不足
      調(diào)整光源角度或更換環(huán)形均勻光源;手動(dòng)校準(zhǔn)識(shí)別閾值
      設(shè)備無法開機(jī)
      電源接觸不良/保險(xiǎn)絲熔斷
      檢查插座與電源線連接;更換同規(guī)格保險(xiǎn)絲
      觸控屏無響應(yīng)
      屏幕臟污/系統(tǒng)卡頓
      用干軟布清潔屏幕;重啟設(shè)備或恢復(fù)出廠設(shè)置
      計(jì)數(shù)結(jié)果無法保存
      存儲(chǔ)空間不足/權(quán)限限制
      清理歷史數(shù)據(jù)或更換存儲(chǔ)卡;檢查軟件寫入權(quán)限

      結(jié)語?

      菌落計(jì)數(shù)器的精準(zhǔn)性依賴“規(guī)范操作+及時(shí)維護(hù)”。操作者需熟練掌握流程要點(diǎn),定期校準(zhǔn)設(shè)備(建議每月用標(biāo)準(zhǔn)樣片驗(yàn)證計(jì)數(shù)誤差≤5%),并建立故障記錄表以優(yōu)化應(yīng)對(duì)經(jīng)驗(yàn)。唯有如此,方能為微生物檢測(cè)提供可靠的數(shù)據(jù)支撐。

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